科研服务 时间：2020-07-17 16:42:00 浏览：11132次
基因敲除敲入技术一直是研究特定基因功能的有效工具。3499拉斯维加斯利用最新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲除和定点突变。
技术原理
Clustered Regularly Interspaced Short PalindromicRepeats（CRISPR）/Cas是细菌和古细菌不断进化而获得的免疫防御机制，其中II型CRISPR/Cas免疫系统依赖Cas9内切酶家族靶向和剪切外源DNA。CRISPR/Cas9系统通过小导向RNA(sgRNA)对切割区域进行识别，进而利用Cas9内切酶实现靶向区域的切割以产生DNA双链断裂。该系统灵活简单，可实现多个靶点的同时操作。目前我们采用Double Nicking技术，显著降低脱靶率。服务流程
本平台可制备的动物模型（部分）
| 疾病 | 方法 | 动物 | 模型成功率 | 操作难度 | 耗时程度 |
| 帕金森疾病 | 6-OHDA脑立体定位注射 | Rat | 70%~80% | 简单 | 比较耗时 |
| MPTP、IP或SC注射（急性or慢性） | Mouse | 70% | 简单 | 快速 | |
| 抑郁症 | 禁食、禁水、夹尾、冰水等慢性不可知刺激 | Rat | 80% | 简单 | 非常耗时 |
| 利血平药物注射或者悬尾和强迫游泳 | Mouse | 60% | 简单 | 非常耗时 | |
| 脊髓损伤 | 脊髓半切、全断、牵张、挤压、打击等 | Rat | 80% | 普通 | 非常耗时 |
| 脑外损伤 | 颅脑损伤仪打击致损 | Rat | 80% | 普通 | 比较耗时 |
|
坐骨神经损伤 （周围神经损伤） |
切断或者夹闭神经（手术） | Rat | 90% | 简单 | 一般 |
| 心肌缺血 | 心脏冠状动脉左前降支结扎 | Rat | 60%~70% | 较难 | 非常耗时 |
| 心力衰竭 | 腹主动脉缩窄手术致心力衰竭 | Rat | 90% | 简单 | 快速 |
| 肺动脉高压 | 手术分流术和MCT IP或SC注射 | Rat | 80% | 普通 | 一般 |
| 高血压 | 单肾单夹肾血管或者两肾一夹型肾血管 | Rat | 80% | 简单 | 快速 |
| 粥样动脉硬化 | 高脂饮食+VD3喂养 | Rat/Mouse | 50% | 简单 | 非常耗时 |
| 大脑中动脉阻塞（MCAO） | 线栓法制备 | Rat | 70% | 普通 | 比较耗时 |
| 慢性支气管炎 | 烟熏 | Rat | 80% | 简单 | 耗时 |
| 过敏性哮喘 | OVA+氢氧化铝致敏 | Rat/Mouse | 80% | 普通 | 耗时 |
| 肺炎模型 | 鲍曼不动杆菌气道滴注 | Rat/Mouse | 90% | 简单 | 快速 |
| 肝炎—肝硬化—肝癌 | DEN诱导 | Rat | 80% | 简单 | 比较耗时 |
| 肝纤维化 | CCL4诱导 | Rat | 80% | 简单 | 耗时 |
| 胆结石模型 | 喂养致石饲料 | Mouse | 90% | 简单 | 一般 |
| 急性胰腺炎 | 牛黄胆酸钠胰胆管注射 | Rat | 90% | 普通 | 快速 |
| 急性肾衰竭 | 顺铂尾静脉注射/肾动脉缺血 | Rat | 80% | 普通 | 一般 |
| 体内血栓 | 手术或者药物诱导 | Mouse | 60-70% | 普通 | 比较耗时 |
| 关节炎模型 | Ⅱ型胶原+佐剂诱导 | Rat/Mouse | 90% | 简单 | 一般 |
| Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病 | STZ或增加高脂饲料喂养药物诱导 | Rat/Mouse | 80% | 简单 | 比较耗时 |
| 荷瘤鼠/裸鼠成瘤 | 皮下成瘤 | BALB/cA-nu mice | 90% | 简单 | 一般 |
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【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！
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