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蛋白质组学
同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)

时间:2020-07-20 15:01:00 浏览:10307次


iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术是由美国应用生物系统公司ABI 研发的一种多肽体外标记技术。iTRAQ 4标 或8标的同位素标记试剂由4种相对分子质量分别为114,115,116和117Da或8种相对分子质量分别为113 ,114 ,115,116,117,118,119 和121Da的报告基团(reporter group),相对分子质量分别为31~24Da的质量平衡基团(balance group)以及一个相同的肽反应标记试剂基 团(peptide reactive group)组成。不同的报告基团分别与相应的平衡基团相配后,相对分子质量均为145,即等量异位标签(isobaric tag)。


iTRAQ技术优势:

  • 同时对2-8种不同条件样品进行蛋白质差异分析;
  • 不会破坏所测定的蛋白质;
  • 适合样品类型多:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等;
  • 与凝胶分离的蛋白质定量技术相比,iTRAQ质谱定量技术可检测到更多类型的蛋白质分子,如低丰度蛋白质、强酸(碱)性蛋白质、<10KD或>100KD的蛋白质分子;高通量,可一次实验,实现多个样品的蛋白质定性定量;
  • 标记完全,标记效率高达97%以上;
  • 几乎兼容所有来源的样本;
  • 定量敏感,反应速度快,实验周期短。


样本要求:

动物组织:黄豆粒大小,—80℃冰箱或者液氮保存,干冰运输;

细胞样本:细胞量大于10的7次方,—80℃冰箱或者液氮保存,干冰运输。


结果提供:

样本质质检报告;

实验原理、操作流程、试剂耗材、结果说明;

提供标准生物学分析。


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