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病理学检测
常规(HE)染色技术

时间:2020-07-22 16:56:00 浏览:4067次


常规染色或HEHaematoxylin and eosin)染色。它是病理技术中最常用的一种方法,通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断


一、病理染色

病理学的所有切片,都必须通过一种以上的染料,通过各种不同的方法,将切片中各种不同的物质,在不同染液的作用下,将其显示出来,使之在光学显微镜下,能够完全的观看各种结构。例如,HE染色,好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构,细胞核着蓝黑色,细胞浆着粉红色,软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供可靠的依据,因此,染色技术也是病理技术中的重要组成部分,必须不断地总结,方能提高。如果染色不好,切片染色一团糟,红蓝不分,结构不清,层次不明,影响了镜下的观察,直接影响了临床诊断,染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。


二、染色方法及步骤

1、脱水透明:

由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精。

2、浸蜡包埋:

将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋:先制备好容器,倒入已溶化的石蜡,迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块。

3、切片与贴片:

将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片, 5—8微米厚。切下的薄片放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45℃恒温箱中烘干。

4、人工苏木素,伊红染色法(HE法)
(1)
切片浸入二甲苯中5-10min
(2)
切片浸入二甲苯中5-10min
(3)100%
酒精1min
(4)100%
酒精1min
(5)95%
酒精1min
(6)95%
酒精1min
(7)90%
酒精1min
(8)80%
酒精1min
(9)
自来水洗1min
(10)
浸入苏木素染液浸染10-15min
(11)
自来水洗30second-1min
(12)1%
盐酸酒精分化30second
(13)
流水冲洗15min以上。
(14)1%
伊红酒精染3-5min
(15)90%
95%酒精分化30sec
(16)95%
酒精30sec-1min
(17)95%
酒精30sec-1min
(18)95%
酒精30sec-1min
(19)100%
酒精1min
(20)100%
酒精1-2min
(21)
碳酸二甲苯1min
(22)
二甲苯1-2min
(23)
二甲苯1-2min
(24)
二甲苯1-2min
(25)
中性树胶封固。


三、结果提供 细胞核被染成深蓝黑色;细胞浆被染成粉红色;软骨及钙盐被染成蓝色;胶原纤维染成淡粉红色,嗜酸性细胞及嗜酸性颗粒呈鲜红色;弹力纤维呈淡粉红色;某些蛋白性物呈粉红色等。

1、完整的实验报告(包含试剂、耗材、操作步骤、病理结果);

2、原始病理照片,一般提供100倍、400倍照片各2张;

3、如果客户提供的是组织,我们提供石蜡块、染色片


四、样本要求:

取材保持组织新鲜(组织块以小于2cm*1.5cm*0.3cm为宜),立即放入固定液(固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液,体积为组织块的10倍以上)中,避免干燥,4°冰箱保存

结果展示



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过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化 肺炎大鼠模型
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病理学检测 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色 CRISPR/Cas9动物敲除/敲入
原位杂交 基因敲除大鼠/小鼠
荧光原位杂交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等)
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